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自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究進(jìn)展

日期:2025-09-16 04:05
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摘要:

 自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)是一個(gè)**神經(jīng)系統(tǒng)**藥理學(xué)評價(jià)及神經(jīng)科學(xué)學(xué)科研究的常用方法,自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)已經(jīng)發(fā)展成一類可對多種動(dòng)物觀察多項(xiàng)自發(fā)活動(dòng)分類行為指標(biāo),并為包括**神經(jīng)系統(tǒng)**藥理學(xué)研究在內(nèi)的多種藥理學(xué)研究目的提供參數(shù)的重要方法。近年來研制的新試驗(yàn)裝置和發(fā)展的新方法具有較多優(yōu)點(diǎn),本文簡要介紹近年來鼠、豬與猴自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究若干進(jìn)展。

關(guān)鍵詞 自發(fā)活動(dòng);開場試驗(yàn);**藥理學(xué);藥理學(xué)方法

自發(fā)活動(dòng)行為測定是一些神經(jīng)科學(xué)學(xué)科研究動(dòng)物的安寧、神經(jīng)行為遺傳學(xué)及腦功能的重要參數(shù),作為**神經(jīng)系統(tǒng)臨床前觀察**行為作用和**藥理學(xué)評價(jià)的始初篩選一般包括行為和活動(dòng)測定。活動(dòng)行為監(jiān)測亦是觀察生存健康的主要生理指標(biāo)及研究賓主共棲生物的影響和環(huán)境因子的一種手段。因此,活動(dòng)行為監(jiān)測已經(jīng)滲透到大多數(shù)嚙鼠類動(dòng)物廣泛范圍的各項(xiàng)研究,并已擴(kuò)大到對非人靈長類動(dòng)物等的研究,無論作為主要關(guān)注點(diǎn)還是附加方法,已涉及研究靈長類的時(shí)間生物學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、毒理學(xué)范疇。各種動(dòng)物有其自身的自發(fā)活動(dòng)類型,因而測量裝置應(yīng)按動(dòng)物特點(diǎn)設(shè)計(jì)。監(jiān)測動(dòng)物行為活動(dòng)的方法有紅外線光束、超聲波、視頻分析、電壓金屬板、運(yùn)動(dòng)傳感器、機(jī)械振動(dòng)傳感測定、機(jī)械裝置、植入遙感勘測傳送裝置等定量活動(dòng)行為方法。抖籠法、抖籠滴水法、轉(zhuǎn)輪法、斜籠法、運(yùn)動(dòng)計(jì)量法等以往的經(jīng)典方法現(xiàn)已不常用。近年來研發(fā)的一批新裝置和發(fā)展了一批新方法具有較多優(yōu)點(diǎn),本文簡要介紹近年來自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究若干進(jìn)展。

1 .小鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)

小鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)是應(yīng)用*廣的自發(fā)活動(dòng)行為測定方法,其中多數(shù)用紅外線光束法測定小鼠的自發(fā)活動(dòng)總數(shù),或用開場法人工或自動(dòng)記錄穿越格數(shù)、后腿站立次數(shù)、理毛次數(shù)、大便粒數(shù)、豎起或修飾次數(shù)(兩前肢離地1cm以上的次數(shù))、豎起或修飾時(shí)間(兩前肢離地1cm以上的時(shí)間),但多數(shù)方法忽略呼吸、頭與尾動(dòng)作及顫動(dòng)等小的移動(dòng)。近年采用計(jì)算機(jī)視頻跟蹤系統(tǒng)能監(jiān)測垂直與水平移動(dòng)包括走動(dòng)、
跳動(dòng)和頭部活動(dòng)。

1.1 VidiomexV圖象分析法

該系統(tǒng)測定開放場區(qū)的小鼠自發(fā)活動(dòng),給藥后將小鼠單只放入墊有黑色橡膠板的開放場(35 cm×30 cm×22cm),適應(yīng)環(huán)境10min,視頻圖象顯示和圖象分析儀均由電腦操作調(diào)控完成。圖象分析系統(tǒng)自動(dòng)顯示和記錄自發(fā)活動(dòng)10min,測定參數(shù)包括走動(dòng)距離、行走時(shí)間、靜止時(shí)間和平均速度。作者用該法研究按Roth改良法給予15種不同處理組成的非預(yù)知性緊張性刺激復(fù)制的慢性應(yīng)激小鼠與正常小鼠的自發(fā)活動(dòng),發(fā)現(xiàn)兩組參數(shù)無顯著差異。陽性對照藥抗抑郁藥地昔帕明l5II1g·kg能使應(yīng)激小鼠的走動(dòng)距離、行走時(shí)間和平均速度縮短,而靜止時(shí)間延長。提示地昔帕明對應(yīng)激動(dòng)物有**作用,而巴戟天低聚糖處理小鼠的自發(fā)活動(dòng)無顯著變化,提示該藥無興奮或**作用。

1.2 嚙鼠試驗(yàn)籠法

每個(gè)試驗(yàn)籠(40 cm×25 cm×15 em)放于12 em厚墻內(nèi)的隔音木箱中,低高二個(gè)紅外光束探頭置于離地2、8cm處,地面墊1cm厚鋸屑。
測量參數(shù)有:
① 走動(dòng),由低位探頭測量小鼠在試驗(yàn)籠內(nèi)的水平位走動(dòng);
②站起:由高位探頭記錄站起次數(shù)與站起所需時(shí)間的比例;
③活動(dòng)總數(shù):連續(xù)的接觸試驗(yàn)籠的次數(shù),即傳感器接受動(dòng)物所致試驗(yàn)籠的各種振動(dòng)如走動(dòng)、站起及搖動(dòng)、震動(dòng)、抓搔、修飾。測量時(shí)間為3個(gè)連續(xù)的20min。每鼠僅測1次活動(dòng)參數(shù)。
用該法研究出生后10~12 d小鼠,開始給鐵劑7.5 mg·kg~,61d后同時(shí)加用安定藥氯氮平1或5mg·kg一,或安定藥氟**醇1 mg·kg一,連續(xù)3周,末次藥后24 h內(nèi)測定自發(fā)活動(dòng),每只記錄60min,然后注射阿樸**1mg·kg 再記錄60 min。結(jié)果顯示:出生后給鐵劑可減少頭2個(gè)20分的活動(dòng),而末20min顯示活動(dòng)增加。氯氮平5 lTlg·kg亞慢性給藥,可削弱或完全消除出生后給鐵所致頭2個(gè)20min活動(dòng)減少,削減給鐵致末20min走動(dòng)和活動(dòng)總數(shù)增高,而對站起則無作用。氟**醇亞慢性給藥對出生后不加鐵者可增加頭20min的走動(dòng)和第2個(gè)20min的站起數(shù)。氟**醇亞慢性給藥可消除出生后給鐵組頭2個(gè)20min的活動(dòng)減少,也消除出生后鐵所致末20min的活動(dòng)增加,作用大于高劑量氯氮平。出生后加鐵組給阿樸**后可增加走動(dòng)和站起,而不增加活動(dòng)總數(shù)。氯氮平1、5mg·kg亞慢性給藥降低出生后加鐵引起的走動(dòng)增加,氯氮平5lTlg·kg進(jìn)一步升高出生后給鐵引起的站起增加。氯氮平和氟**醇亞慢性給藥再給阿樸**可增加出生后賦形劑處理小鼠的走動(dòng),而氯氮平則增加站起數(shù)。該文這種給藥后分時(shí)間段測定自發(fā)活動(dòng)數(shù)和添加工具藥的方法,有益于分析**影響自發(fā)活動(dòng)的作用特點(diǎn)]。

2 .大鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)

2.1 開場試驗(yàn)

開場環(huán)境試驗(yàn)所伴有的溫和緊張性刺激對動(dòng)物是在一種新奇背景中的自發(fā)活動(dòng)行為評價(jià)。動(dòng)物在開場環(huán)境的活動(dòng)是一種綜合行為,包含對新環(huán)境的恐懼、高度激勵(lì)和不斷地探查。因此,可因逃跑反應(yīng)而增加活動(dòng)或呆住反應(yīng)而減少活動(dòng),其中包含恐懼或焦慮因素,由于動(dòng)物情緒狀態(tài)的即時(shí)調(diào)節(jié)及其自體修飾、排便和排尿等行為和生理學(xué)反應(yīng)而維持平衡。Weiss等_5報(bào)告了大鼠隔離飼養(yǎng)對開場試驗(yàn)自發(fā)活動(dòng)的影響。位于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的開放場由暗灰色塑料制成的4個(gè)正方形(76.5cm×76.5cm×49cm)區(qū)域組成,12勒克司弱光照明。視頻照相機(jī)固定于4個(gè)區(qū)域的上方并傳輸?shù)奖O(jiān)控器和視頻跟蹤運(yùn)動(dòng)分析系統(tǒng),記錄大鼠在整個(gè)場區(qū)的活動(dòng)行為作為總行走距離(cm),此外,在開場區(qū)設(shè)定一個(gè)虛擬的場區(qū)中心,大鼠在該區(qū)內(nèi)的活動(dòng)用作評價(jià)冒險(xiǎn)行為。大鼠在試驗(yàn)場內(nèi)適應(yīng)60min后稱體重,逐一放入開放場區(qū)中央進(jìn)行試驗(yàn),在60min的試驗(yàn)期內(nèi)動(dòng)物分組平均地進(jìn)行。雄雌分別隔天進(jìn)行活動(dòng)計(jì)數(shù)10min,并分析試驗(yàn)期間動(dòng)物糞便存積數(shù)。大鼠分兩組,一組從21天齡起斷乳后每籠1鼠隔離飼養(yǎng),另組每籠3~4鼠群居飼養(yǎng)。結(jié)果顯示,兩組動(dòng)物能適應(yīng)開放場環(huán)境,雌鼠的移動(dòng)距離(1610.1±154.7cm)多于雄鼠(999.7±109.1cm),但1 h內(nèi)每10min測得的分段移動(dòng)距離兩組均逐步減少。如同在整個(gè)場區(qū)的活動(dòng)一樣兩組動(dòng)物在中心區(qū)的活動(dòng)也顯著地逐步減少,亦以雌鼠(184.7±33.7cm)高于雄鼠(59.2±12.3cm)。群居或隔離飼養(yǎng)不影響大鼠的自主活動(dòng)。性別和群居隔離飼養(yǎng)對大鼠在整個(gè)場區(qū)或中央?yún)^(qū)內(nèi)的移動(dòng)距離均無相互作用。雌雄在開放場環(huán)境的排便量相似,群居隔離飼養(yǎng)及性別與群居隔離飼養(yǎng)間相互作用對排便無影響。

2.2 改良開場試驗(yàn)

該試驗(yàn)可結(jié)合觀察對刺激物的注意力,裝置的閉路視頻相機(jī)置于方形白色室壁開放場箱(60 cm×60 em×45cm)上方50cm處,所有信號由視頻跟蹤系統(tǒng)分析并收集于電腦,試驗(yàn)時(shí)紅光照明以增強(qiáng)物體與背景的對比并減少動(dòng)物的陰影。占場區(qū)1/9的中心區(qū)由電腦分析器單獨(dú)監(jiān)控。試驗(yàn)開始前將4cm×4cm×2cm固體泡沫塑料塊作為刺激物用螺絲固定放于中心區(qū)的中心。大鼠不必離室壁移動(dòng)很遠(yuǎn)而容易地穿越中心區(qū),這種設(shè)計(jì)的基本原理是創(chuàng)造一個(gè)環(huán)境使大鼠有低而可靠的可能性進(jìn)入中心區(qū)而不管存在目標(biāo)與否。為確證進(jìn)入中心區(qū)與對刺激物的注意力有關(guān),將動(dòng)物頭部用記號筆涂黑,使相機(jī)僅跟蹤大鼠身體的該特征。10min試驗(yàn)期間每2.5min由電腦收集資料一次,以評價(jià)參數(shù)的動(dòng)態(tài)變化。行為測量包括總移動(dòng)距離、進(jìn)入中心區(qū)的次數(shù)、持續(xù)在中心區(qū)的時(shí)間、進(jìn)入中心區(qū)平均所需時(shí)間(s/進(jìn)入)。該研究用開放場試驗(yàn)延伸分析動(dòng)物對刺激目標(biāo)的反應(yīng),而不引起活動(dòng)增高的干擾,提供了一個(gè)動(dòng)物對外界特殊刺激反應(yīng)的行為指標(biāo),動(dòng)物在試驗(yàn)期間即使重復(fù)應(yīng)用相同的刺激物亦不降低對目標(biāo)的反應(yīng),表明新奇不是引起探究反應(yīng)的重要因素。調(diào)節(jié)開放場大小、放刺激物區(qū)域的大小與位置、刺激物的大小與成分以及試驗(yàn)期限能改變并擴(kuò)充行為測量的內(nèi)涵。如放置一個(gè)有氣味的目標(biāo)食物,然后除去食物,量化動(dòng)物對食物刺激目標(biāo)的行為反應(yīng),可用在中心區(qū)的停留時(shí)間以評價(jià)食物刺激的不同功效和評價(jià)厭食藥的影響。同樣,與性別相關(guān)的有氣味刺激物也能用作評價(jià)**和藥理學(xué)變量對性別相關(guān)刺激反應(yīng)的影響。表明該方法對種種行為背景潛在的適用性,結(jié)合定量跟蹤動(dòng)物對特殊刺激目標(biāo)的自發(fā)行為反應(yīng)是行為神經(jīng)科學(xué)一種有適用性的方法學(xué)。

2.3 計(jì)算機(jī)圖像法評價(jià)自發(fā)活動(dòng) 

嚙齒動(dòng)物活動(dòng)圖像自動(dòng)識(shí)別裝置(the rodent activity patternidentifi.cationdevice,RAPID)由觀察環(huán)境、圖像獲取硬件和軟件、圖像分析和分類程序、資料分析程序等部件組成。觀察箱為一底長52.5cmX高23.5cm的梯形樹脂玻璃箱,分成兩個(gè)等大的小室,室間壁上有6個(gè)直徑1.2cm的小孑L,以使同步試驗(yàn)的對照和處理大鼠彼此看見并聞到氣味,2個(gè)視頻探頭分別置于觀察箱上方與側(cè)面約1ITI處,可從2個(gè)方向觀察大鼠的任何復(fù)雜活動(dòng)。觀察室白光照明,其大小的限制取決于視頻照相機(jī)的像素,256X256像素的分辨率將適合于評價(jià)大致的活動(dòng)行為,如增加到512×512像素,則對小鼠或大鼠整體可仔細(xì)分辨,如足與尾巴的活動(dòng)亦不會(huì)遺漏。該RAPID系統(tǒng)規(guī)定的動(dòng)作分類盡可能接近于明確的行為動(dòng)作、狀態(tài)、姿勢、面部表情、抗議和動(dòng)作趨勢。包括5個(gè)主要身體姿勢和8種修飾動(dòng)作,兩組13種動(dòng)作相互關(guān)聯(lián)而又獨(dú)立,13個(gè)“單元?jiǎng)幼鳌钡碾p元結(jié)合形成27個(gè)不同的組合動(dòng)作。5個(gè)主要身體姿勢之一和8種修飾動(dòng)作結(jié)合被定為一個(gè)組合動(dòng)作類別,體位姿勢伴有修飾動(dòng)作時(shí)的組合動(dòng)作呈配對發(fā)生。

表1 RAPID行為動(dòng)作分類法的行為動(dòng)作操作說明

主要身體姿勢                     說明
站立                   大鼠四肢著地,身體不移動(dòng)坐身體前半部抬起,身體前部和后部幾乎成直角,身體后部著地
站起                  用后腿站起,身體趨于垂直,前部抬起
行走                  大鼠四肢著地走動(dòng)
躺下                   身體腹部著地,不移動(dòng)(至少需要5個(gè)畫面)

修飾類動(dòng)作

空白                     修飾不能識(shí)別
修飾                   嘴和足底觸及身體
頭轉(zhuǎn)動(dòng)                 頭水平移動(dòng)超過l5o
觀望                   頭向上但不針對一個(gè)目標(biāo),身體不移動(dòng)
聞                        鼻子觀測籠壁的一個(gè)孑L
嗅                      鼻子對著一個(gè)目標(biāo):地面或墻壁,身體不移動(dòng)
轉(zhuǎn)動(dòng)                   頭和身體水平移動(dòng)超過20~
洗臉                  前蹄在頭部挪動(dòng)

通過分析個(gè)體間的可變性、對照值的重現(xiàn)性和受試物處理效應(yīng)的穩(wěn)定性考察實(shí)驗(yàn)裝置的可靠性,發(fā)現(xiàn)RAPID系統(tǒng)行為動(dòng)作的分類和3個(gè)經(jīng)訓(xùn)練的人工觀察者的分類相比,統(tǒng)計(jì)兩者的Kappa值有高度一致性。人工觀察和RAPID分類的修飾活動(dòng)如嗅和聞彼此間亦有很好一性。評價(jià)2個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室34只對照大鼠的變異系數(shù),雖種系相同但并非無病原體,體重為2~3周齡,顯示主要身體姿勢動(dòng)作的出現(xiàn)率大多數(shù)在25%~35%的范圍內(nèi)。將D.***1mg·kg處理大鼠的反應(yīng)重現(xiàn)性與文獻(xiàn)值比較,3名獨(dú)立測量者的資料有明顯一致性和重性,動(dòng)物活動(dòng)數(shù)、總活動(dòng)時(shí)間和動(dòng)作的時(shí)間分布和時(shí)間次序有高度相關(guān)性。該裝置采用自動(dòng)控制可降低偏見和減少誤差,消除觀察者的可變性,使手續(xù)程序輕松快捷,且可長久記錄觀察資料。由于近來硬件成本顯著降低,且系統(tǒng)能觀察大量動(dòng)物,同時(shí)從幾個(gè)視頻記錄器的終端得到資料,如設(shè)計(jì)15min同時(shí)觀察2只大鼠,3個(gè)終端每小時(shí)觀察6只大鼠,8h能觀察72對,并能保存和分析所有資料,因此十分經(jīng)濟(jì)和高效 。

2.4 探測身體輻射熱法試驗(yàn) 

Supermex系統(tǒng)用傳感器探測動(dòng)物身體輻射熱來測量活動(dòng)行為,傳感器置于透明兩烯酸鼠籠上方,兩側(cè)有一對紅外熱電探測器即站起傳感器以測量動(dòng)物站起的輻射熱,該系統(tǒng)可發(fā)現(xiàn)一個(gè)直徑6m和上方視野110。的圓錐形區(qū)域內(nèi)溫度高于背景5℃的任何目標(biāo),每個(gè)傳感器探頭能監(jiān)測籠內(nèi)多個(gè)區(qū)域動(dòng)物在X、Y、Z軸的移動(dòng)活動(dòng),適用于嚙齒類小動(dòng)物或小型長尾猴到大動(dòng)物犬、猴和豬等動(dòng)物,操作非常簡便,靈敏度不需調(diào)節(jié),傳感器可以固定置于鼠籠上方的天花板,一個(gè)Super.mex能任意選擇分析80個(gè)接口記錄的數(shù)據(jù)。一名操作者能同時(shí)監(jiān)控5只大鼠,自動(dòng)匯總記錄15min所得計(jì)數(shù)。用該系統(tǒng)測試發(fā)現(xiàn)促甲狀腺素釋放**和垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽腦室內(nèi)給藥能劑量依賴地顯著增加自發(fā)活動(dòng),促甲狀腺素釋放**200或4OOnmol產(chǎn)生的活動(dòng)總計(jì)數(shù)5000次,為對照的250% ,垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽1 mnol是對照的300% ,2mnol的總計(jì)數(shù)9 000次為對照的750%,而2nmol血管活性腸肽改變自發(fā)活動(dòng)計(jì)數(shù)不顯著。站起行為因**數(shù)明顯低于自發(fā)活動(dòng)故有更大的差異性,上述肽類所致的站起行為改變類型類似于自發(fā)活動(dòng)變化的類型。促甲狀腺素釋放**和垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽能劑量依賴地顯著增加活動(dòng)數(shù),促甲狀腺素釋放**4OOnmol的站起數(shù)是對照的261%。垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽1nmol增加站起數(shù)為對照的179% ,2nmol增加數(shù)為對照的400%,血管活性腸肽2nmol不影響站起數(shù)。作者認(rèn)為刺激自發(fā)活動(dòng)可能是由于激活多巴胺能系統(tǒng),而刺激站起行為可能是由于激活去甲。腎上腺素能系統(tǒng)。因此,自發(fā)活動(dòng)行為是觀察**神經(jīng)興奮劑對兒茶酚胺能系統(tǒng)效應(yīng)的一個(gè)好指標(biāo)。

3 .小型豬數(shù)字視頻跟蹤系統(tǒng)測定自發(fā)活動(dòng)

3.1 測定方法

連接數(shù)字視頻記錄器的記錄豬自發(fā)活動(dòng)的單色錄像機(jī),能監(jiān)控整個(gè)場區(qū)(2m×3.15m)四角和每側(cè)墻壁的中央以獲取參數(shù)。7頭18月齡雌性小型豬于進(jìn)入研究前適應(yīng)環(huán)境6個(gè)月,用D.***處理5次以使動(dòng)物有相似的興奮程度,末次給藥在6個(gè)月前完成。試驗(yàn)開始前1周作3個(gè)30min的場區(qū)環(huán)境適應(yīng),測試10:O0~15:O0間的自發(fā)活動(dòng)。每個(gè)d3做動(dòng)物試驗(yàn),先給賦形劑0.9%NaCl 0.2ml,隨后以0.05、0.1、0.3mg·kg。。的遞增劑量3次im鹽酸阿樸**。注射后立即引入場內(nèi),靜置1h,然后視頻記錄自發(fā)活動(dòng)60min。結(jié)果表明該法有很好的可重復(fù)性,試驗(yàn)對每頭豬跟蹤10rain,7頭豬跟蹤兩次的平均移動(dòng)距離是29.6±9.6m,平均誤差是0.10±0.02 m,可重復(fù)性系數(shù)0.6%,表明該方法有高的可重復(fù)性。

3.2 **性評價(jià)
 
為了評價(jià)基礎(chǔ)干擾水平對**性的影響,將一只大約與豬相同大小和顏色(淺米色)的箱子(30cm×47em)作為一個(gè)固定目標(biāo)放在開放場并“跟蹤”10rain,用計(jì)算機(jī)從該箱記錄的移動(dòng)距離估計(jì)計(jì)算方法的**性,結(jié)果顯示對該目標(biāo)記錄的誤差僅一個(gè)像素,估計(jì)移動(dòng)距離為2m。試驗(yàn)10min內(nèi)對照的平均移動(dòng)距離為42 4-17 m,能增加豬活動(dòng)的阿樸**0.05 mg·kg作陽性對照為157±46m,誤差大小與豬的總移動(dòng)距離有關(guān),約相當(dāng)于移動(dòng)距離預(yù)計(jì)誤差的1% ~5% ,表明該方法有很高的**性。

3.3 方法學(xué)評價(jià) 

用轉(zhuǎn)盤法估計(jì)對移動(dòng)目標(biāo)跟蹤過程的**性,在距平均轉(zhuǎn)速0.02 m·s 的黑色圓盤(直徑34 cm)中心14cm處放一15lllln的白點(diǎn),用跟蹤軟件估計(jì)的距離與白點(diǎn)移動(dòng)的實(shí)際距離比較,白點(diǎn)準(zhǔn)確移動(dòng)二輪的計(jì)算值表示實(shí)際距離的百分比。結(jié)果表明,跟蹤轉(zhuǎn)盤上的移動(dòng)白點(diǎn)的軌跡與跟蹤系統(tǒng)所記錄的實(shí)際軌道有很好的一致性。該點(diǎn)移動(dòng)距離的實(shí)際計(jì)算值是176cm,而跟蹤軟件估計(jì)的移動(dòng)距離是192cm,,跟蹤系統(tǒng)高估移動(dòng)距離9%。這種偏差主要是由于偏離標(biāo)準(zhǔn)的像素大小。跟蹤系統(tǒng)識(shí)別該點(diǎn)是離轉(zhuǎn)盤中心的距離不是14cm而是15.2cm,這相當(dāng)于移動(dòng)距離191cm,非常接近于跟蹤運(yùn)算得到的估計(jì)移動(dòng)距離(192em),因此跟蹤軟件在估計(jì)移動(dòng)距離時(shí)的偏差主要來自鏡頭扭曲,引起像素大小偏離標(biāo)準(zhǔn)所致。該方法通過增強(qiáng)動(dòng)物和背景間的對比,以提高跟蹤動(dòng)物的**性,并克服了手工記錄容易疲勞、漏記及帶主觀性等缺點(diǎn)。并證明豬尾巴擺動(dòng)不影響移動(dòng)距離測量的**性。在可控條件下未發(fā)現(xiàn)豬在開放場的中心區(qū)與周邊區(qū)有任何區(qū)域空間偏愛,表明健康豬探測一個(gè)熟悉的區(qū)域無空間偏愛。而大鼠則不同于豬,有沿墻壁行走維持鼻毛與墻壁接觸的不對稱活動(dòng)行為。

4 .小型長尾猴袖珍型活動(dòng)掛表法模型

用于電腦遙控監(jiān)測飼養(yǎng)條件下猴行為活動(dòng)的袖珍型活動(dòng)掛表為帶有32kb內(nèi)存包有圓柱形外套的壓電加速計(jì),猴戴掛合適的活動(dòng)掛表項(xiàng)圈后能很好耐受,約5min后便不再理睬。該裝置可以綜合各個(gè)方向動(dòng)作的強(qiáng)度、數(shù)量和持續(xù)時(shí)間,能測出大于0.5g作用力的活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)前24h將該裝置掛于動(dòng)物的頸項(xiàng),每天定時(shí)測定15min,連續(xù)14d。試驗(yàn)分配對組8只猴(雄性切除輸精管)飼養(yǎng)于4只籠內(nèi)與群居組8只單一性別猴飼養(yǎng)于有管道相連的二只籠內(nèi),地面上方1m處有400勒克斯照明,12h的明暗周期。該法的顯著優(yōu)點(diǎn)是可以實(shí)時(shí)非侵害性地監(jiān)測群聚在單個(gè)測試區(qū)域內(nèi)的多只動(dòng)物的自發(fā)活動(dòng),并便利地以*小干擾監(jiān)測動(dòng)物在居籠內(nèi)的一種關(guān)鍵行為指標(biāo),而不用改變動(dòng)物生活環(huán)境。這種在居籠內(nèi)的行為和生理學(xué)監(jiān)測,因?yàn)楸3謩?dòng)物的平靜,而具有科學(xué)的正確性和實(shí)用性¨。。。

5 .結(jié)語

自發(fā)活動(dòng)方法學(xué)研究的新進(jìn)展表明,自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)已經(jīng)發(fā)展成一類可對多種動(dòng)物觀察多項(xiàng)自發(fā)活動(dòng)分類行為指標(biāo),并為包括**神經(jīng)系統(tǒng)**藥理學(xué)研究在內(nèi)的多種藥理學(xué)研究目的提供參數(shù)的重要方法。多種多樣的自動(dòng)化視頻跟蹤實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備與**定量的測量指標(biāo)已取代肉眼目測、手工記錄、裝置簡易與觀察指標(biāo)不多的傳統(tǒng)方法。上述新近發(fā)展的自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法給我們帶來許多值得重視的啟示:實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)適合動(dòng)物習(xí)性,活動(dòng)室所用建筑材料與色澤、活動(dòng)區(qū)大小、環(huán)境隔音、光照強(qiáng)度、對環(huán)境的性別差異、觀察持續(xù)時(shí)間與間隔選擇等對不同的動(dòng)物均應(yīng)有不同的要求,否則可能會(huì)影響動(dòng)物本能的自發(fā)活動(dòng)的真實(shí)性。不同動(dòng)物應(yīng)觀察其自身特有的自發(fā)活動(dòng)行為,如小鼠自發(fā)活動(dòng)的方式有走動(dòng)、前肢上舉、抓搔、洗臉、舐足、嗅聞、咬等,大鼠、豬、猴亦均有自身的自發(fā)活動(dòng)特點(diǎn)及自發(fā)活動(dòng)晝夜時(shí)辰與日間分布規(guī)律,因此應(yīng)設(shè)計(jì)不同的觀察指標(biāo)在不同的時(shí)間作觀察,并應(yīng)盡可能在動(dòng)物處于生理狀況下取得不受人為干擾的真實(shí)原始數(shù)據(jù)。分類測定自發(fā)活動(dòng)行為的各個(gè)單元?jiǎng)幼鳎蓞^(qū)分**作用的特點(diǎn)。分析**對自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)中走動(dòng)、站起等不同指標(biāo)的影響可以探討**作用的機(jī)理,有作者認(rèn)為刺激自發(fā)活動(dòng)總數(shù)可能是由于激活多巴胺能系統(tǒng),而刺激站起行為可能是由于激活去甲腎上腺素能系統(tǒng)。因此,自發(fā)活動(dòng)行為是觀察**神經(jīng)興奮劑對兒茶酚胺能系統(tǒng)效應(yīng)的一個(gè)好指標(biāo)。
根據(jù)**特點(diǎn)在自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)中添加目標(biāo)刺激物、氣味或性別特異性等目的刺激物,在觀察自發(fā)活動(dòng)的同時(shí)觀察動(dòng)物對這些刺激物的注意力,或許可以發(fā)現(xiàn)**新的藥理作用。藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)研究是藥理學(xué)的重要組成,研究方法的改進(jìn)與**將會(huì)推動(dòng)藥理學(xué)科的發(fā)展,因此也應(yīng)該是藥理學(xué)者研究的重要內(nèi)容,從本文簡述的自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究若干進(jìn)展,提示被認(rèn)為十分簡單的自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法也是大有研究價(jià)值的,藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)研究應(yīng)該成為藥理學(xué)工作者共同關(guān)注的藥理學(xué)分枝學(xué)科。
                               
摘自<中國臨床藥理學(xué)與**學(xué)>

京公網(wǎng)安備 11010702001818號

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